環保試劑與傳統試劑冷凍制片效果的比較
環保試劑與傳統試劑冷凍制片效果的比較
薛曉偉 王德田 李星奇 鐘定榮
中國醫學科學院北京協和醫院病理科
摘自:2013年第08期《診斷病理學雜志》
在日常手術快速病理工作中,尋找一種安全有效的環保試劑替代傳統試劑有重要的意義。本文就GS試劑與傳統試劑染色效果和診斷價值進行比較。
1. 材料與方法
1.1材料
取自協和醫院手術快速冷凍標本,每種標本各制做2套切片。GS冷凍病理切片染色套液(哈爾濱格林標本技術開發有限公司)、丙酮、乙醇、二甲苯均為國產分析純;徠卡CM3050冷凍切片機和徠卡OCT包埋劑。
1.2方法
切取新鮮子宮平滑肌瘤、結節性甲狀腺腫和乳 腺纖維腺瘤標本,置于冷凍臺上,組織周圍滴加OCT,冷凍2 ~5 min,待組織塊變硬后,使用CM3050S冷凍切片機制作厚 度在5 ~7 μm的冷凍切片2套。
1.2.1傳統試劑
切片入丙酮固定后,依次進入蘇木精,分化,返藍,伊紅,梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
1.2.2環保試劑
切片入GS固定液,依次入GS蘇木精、 分化、藍化、伊紅,梯度乙醇,GS除浮染液、除水透明和透明 液,GC~02封片膠封固。
2. 結果
采用環保試劑制備的快速病理切片,固定效果較好,染液滲透力強,組織結構清晰,核漿分明,色彩鮮艷,脫水透明效果較好,在子宮平滑肌瘤、結節性甲狀腺腫、乳腺纖維腺瘤3種組織中的染色效果與傳統試劑無明顯差異(圖1 ~3)。
3. 討論
冷凍切片廣泛應用于手術中的快速病理診斷。冷凍切片質量好壞是診斷正確與否的重要因素。
完成冷凍切片后需要進行固定,以防止組織與載玻片分離或懸浮。一旦冷凍制片的任何環節發生脫片,需要重新制作,嚴重影響術中快速病理的診斷速度和質量。固定的另一作用是把蛋白質、酶、糖等沉淀或凝固成不溶性物質,保持組織細胞與正常生活時的形態相似。傳統的冷凍切片固定劑為丙酮、AF液和乙醇等,丙酮屬于高危險性化學試劑, 有刺激性氣味,而GS固定液無色、無味,符合國家環保標 準,是丙酮的良好替代品。
一張優良的冷凍切片要求用時短,切片質量好,染色鮮艷,鏡下組織結構清楚,細胞形態清晰,胞質分明,無脫片和冰晶現象出現,術后冷凍石蠟診斷符合率高。二甲苯因 其價格低廉,透明效果好,是常規應用的透明試劑。但是,二 甲苯對************系統有慢性毒性作用,而使用格林環保試 劑,透明完全,沒有白霧現象,且鏡下觀核漿分明,無色素沉
圖1子宮平滑肌瘤,A為傳統試劑,B為環保試劑
圖2 結節性甲狀腺腫,A為傳統試劑,B為環保試劑
圖3 乳腺纖維腺瘤,A為傳統試劑,B為環保試劑 渣出現,符合優良冷凍制片的標準。
綜上所述,環保試劑在病理常規制片以及免疫組化的應用價值國內外均有文獻報道,格林標本環保試劑,能夠制作出優良的冷凍切片,對于子宮平滑肌瘤、結節性甲狀腺
腫、乳腺纖維腺瘤的診斷價值與傳統試劑沒有差異。
參考文獻
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