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GS環保試劑制作病理大切片的應用

GS環保試劑制作病理大切片的應用

劉洋  薛曉偉  王德田

首都醫科大學附屬朝陽醫院病理科  中國醫學科學院北京協和醫院病理科

摘自:201312期《診斷病理學雜志》

    傳統的固定、脫水及染色試劑中含有甲醛、二甲苯和氧化汞有害物質,雖然在制作病理切片時間悠久,方法也很成熟,但不利于環保和工作人員的身體健康。我院于2012年應用GS環保試劑套液制作全喉大標本15例,每例橫切面、縱切面各5個組織切面,分別進行組織脫水處理,脫水效果與傳統方法基本一致,在制作組織切片上優于傳統方法,是一種完全可以替代傳統試劑的環保型試劑。

1. 材料與方法

 1.1  材料  

收集首都醫科大學病理教研室 一15例,共計120余例組織塊,分成2組,分別用傳統試劑和GS環保試劑進行組織制備和染色,GS環保試劑組織制備和染色試劑均由哈爾濱格林標本技術開發有限公司研制生產。脫水機采用VIP-6型櫻花脫水機,切片機采用VIS-410型櫻花推拉式切片機。

 1.2  方法

傳統試劑組織制備(按常規方法)。GS環保試劑組織制備固定液I6h;固定液II4h80%乙醇1h;905乙醇1h;脫水液I3h×2;透明液2h×2;浸蠟液2h×4。傳統HE染色過程需要40min完成。

    GS染液染色程序 脫蠟液I、II4min;無水乙醇10s;95%乙醇10s;流水洗,蘇木精染液3~5min;流水洗2min;分化液3s;流水洗1min;藍化液5s;流水洗2min;伊紅染色液30s~2min;流水洗10s;梯度乙醇脫水,透明,封固。染色過程需要20min完成。

2. 結果

 2.1  蠟塊質量

采用GS環保試劑制造的組織蠟塊,蠟塊平整無裂,硬度適中,易于切出3~4μm切片,且切片完整,無斷裂,切滑無皺縮脫澆,與傳統試劑脫水制備的蠟塊沒有較大差別。

 2.2  制片質量

GS環保試劑進行HE染色完成的切片光學顯微鏡下觀察蘇木精、伊紅著色均勻;無細胞核皺縮和腫脹變形;可以清楚分辯組織層次(圖1~2),符合優良制片標準。

3. 討論

由于常規石蠟切片較小,給鏡下觀察組織結構造成一定的局限性,為了病理診斷和科研工作的需要,有時為了觀察整個大塊組織的細微結構,必須制作完整的大組織切片,以便能在同一張切片中詳細地觀察到病變及其毗連組織的情況。制作高質量大組織切片的前提是組織處理要適中,這就對固定脫水過程中液體的質量提出了更高的要求。

GS環保型試劑在病理制片中的應用已經有較多的報道,但在大組織切片制作方面鮮有報道。我們采用GS環保型試劑進行大組織切片的組織制造和HE染色,獲得了高質量的組織蠟塊和切片,證明GS環保試劑脫水和染色可靠,更重要的是環保型試劑能將病理科工作人員從甲醛、二甲苯等有毒氣體的工作環境中解脫出來,有利于工作人員的身心健康。

 

參考文獻

[1] 王德田,董建強,梁志勇,實用現代病理學技術[M].北京:中國協和醫科大學出版社,201261-62.

[2] 賀占國,張文,陳靜,等。大組織切片的制作探討[J].診斷病理學雜志,2005,112):74.

[3] 田玉旺,朱紅艷,李琳,GS環保試劑在病理制片技術中的應用[J].診斷病理學雜志,2011,419):312-313.


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