格林環保試劑在特殊染色中的應用體會
格林環保試劑在特殊染色中的應用體會
龐霞 趙華瑩 尹玉慧 宋一民 黃培 張楊蕊 高冬玲
鄭州大學******附屬醫院病理科 河南省腫瘤病理重點實驗室
摘自:2013年03期《診斷病理學雜志》
摘要 目的:格林新型環保試劑在特殊染色中的應用體會。
方法:使用格林新型環保染色試劑和傳統病理染色試劑在十幾種特殊染色中使用及比較。
結果:新型環保GS病理切片染色套液染色效果穩定可靠。
結論:在特殊染色中傳統病理染色試劑完全可以用格林新型環保染色試劑所替代。
關鍵詞:環保試劑;特殊染色;體會
目前,隨著分子生物學技術的發展和應用,逐步代替了許多特殊染色技術,但是由于特殊染色具有簡單、快速和成本低的特點而一直被應用,而且許多特殊染色方法在原來生物基礎上不斷改良和創新,從而不能用其它方法所替代。但是,ATP酶近年來隨著人們對環保意識的提高,實驗室環保問題已備受關注。我們使用了格林新型環保試劑替代傳統病理試劑,現將應用體會和各位老師們討論交流。
1. 材料與方法
1.1材料
來自鄭州大學******附屬醫院病理科標本。
1.2試劑
(1)GS病理切片染色套液:脫蠟液、蘇木素、分化液、伊紅、除水透明液和透明液;(2)傳統病理染色試劑:二甲苯、梯度酒精、蘇木素、1%鹽酸酒精和伊紅;(3)特殊染色的試劑:糖原染色、結核菌染色、六胺銀染色、網狀纖維染色、剛果紅染色、Masson三色染色、黏液卡紅染色、AB-PAS染色、乙酰膽堿酯酶染色、改良Gomori染色、ATP酶染色、NADH染色、SDH染色、NSE染色、油紅O染色。
1.3方法
1.3.1 傳統特殊染色方法
(1)常規石蠟切片;(2)切片經二甲苯Ⅰ、Ⅱ脫蠟各5分鐘;(3)從高到低的梯度乙醇處理,自來水沖洗;(4)按照特殊染色的操作步驟進行染色;(5)從低到高的梯度乙醇脫水;(6)經二甲苯Ⅰ、Ⅱ透明各5分鐘;(7)中性樹膠封固。
1.3.2 GS病理切片染色方法
(1)常規石蠟切片;(2)切片經脫蠟Ⅰ、Ⅱ各兩套均處理5分鐘;(3)100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各3分鐘;(4)95%乙醇3分鐘,自來水沖洗;(5)按照特殊染色的操作步驟進行染色;(6)95%乙醇、100%乙醇Ⅰ、Ⅱ進行脫水;(7)除水透明液兩套各3分鐘;(8)透明液兩套各5分鐘;(9)中性樹膠封固。
2. 結果
GS病理切片染色試劑在十幾種特殊染色中的染色質量和傳統病理染色試劑相當,完全可以用GS病理切片染色試劑替代,減少了有害試劑對空氣和人體的毒害,開創了一個無害環保的新環境。
3. 討論
特殊染色技術目前已經成為臨床病理診斷和鑒別診斷不可缺少的重要工具。一張成功的特殊染色切片有助于病理醫******出準確的病理報告。但傳統染色方法中使用的二甲苯等試劑對人和環境都十分有害。二甲苯作為***常用的苯類試劑大量應用病理組織處理和染色過程中,其毒害作用已經十分肯定,主要是吸入或經皮膚吸收,短期內吸入高濃度二甲苯可出現上呼吸道明顯的刺激癥狀、眼結膜及咽充血、頭暈、惡心、嘔吐、胸悶、四肢無力、意識模糊,長期接觸與癌癥有密切的關系[1-2]。如果苯類試劑不經專業處理直接排入下水道,會造成周邊環境的嚴重污染,若進行專業回收處理會大大提高成本。
隨著******各國對環保意識的提高,實驗室環保問題已備受關注。很多學者[3-5]嘗試用脫色汽油、硬脂酸、異丙醇及松節油等替代二甲苯,雖然取得了一定的效果,但也存在許多弊端。本實驗室使用了哈爾濱格林標本技術開發有限公司研發的新型環保GS病理切片染色套液,與傳統試劑相比優勢如下:(1)新型環保試劑可以自動降解,替代了傳統有害試劑對人類和環境的污染,創建了一個綠色環保病理實驗室;(2)病理切片脫蠟、脫水效果很穩定,未出現脫蠟不足的現象;(3)GS蘇木素染液不含氧化汞,不產生氧化膜,染色效果色彩鮮明,并且不需自行配置,便于實驗室質量控制;(4)透明劑滲透徹底,作用溫和,保證了染色質量。
總之,新型環保GS病理切片染色套液具有創新性和實用性,染色效果穩定可靠,可以替代傳統有毒病理試劑,并且有利人體的健康,減少環境污染,值得病理實驗室廣泛推廣。
參考文獻
1. 高蓉梅,彭鳳翔,李永春,等.TO型生物制片透明劑取代二甲苯在病理制片中的應用[J].診斷病理學雜志,2009,12(2):147.
2. Acton A,Harvey T,Grow M W.An examination of non – fomalinbased fixation methods for xenopus embryos [J].Dev Dyn,2005,233(147): 1464–1469.
3. 周導,顧萍,嚴軍守,等.硬脂酸石蠟混合液替代二甲苯透明劑制片的探討[J].診斷病理學雜志,2006,13(1):75.
4. 張穗,程云芳,張顏春,等.脫色汽油替代二甲苯在組織浸蠟前的應用[J].人民軍醫,1997,40(12):736-737.
5.龍建洲.異丙醇替代二甲苯在組織透明中的應用[J].檢驗醫學與臨床,2010,7(2):161-162.下載地址:/uploadfile/file/20170811/20170811162111_91403.doc